产品分类
- 试剂 (236633)
- 试剂盒 (4403)
- 教学试剂盒 (2)
- PCR恒温荧光测试盒 (190)
- 培养基 (272)
- 抗原/抗体 (4604)
- 细胞技术 (633)
- 分子技术 (274)
- 蛋白技术 (170)
- ELISA试剂盒 (21839)
- 标准品 (2627)
- 进口标准品 (19799)
- 标准溶液 (1)
- 朗道校准品 (0)
- 大孔树脂 (86)
- 朗道质控品 (18)
- 生物细胞 (0)
- 测试盒 (18)
- 动物血清 (166)
- 进口动物血清 (34)
- 动物血浆 (15)
- 人类CDNA (90)
- 基因组DNA (131)
- MicroRNA 产品 (117)
- 总RNA产品 (146)
- 原代细胞裂解液 (135)
- 染色试剂 (2228)
- 热销产品 (646)
- 热销产品2 (7)
- 其他分类 (1305)
公司图片
联系方式
公司新闻
空肠弯曲菌核酸检测试剂盒(一管式PCR-荧光探针法)
发布时间:2018-07-16 10:29 | 点击次数:
空肠弯曲菌核酸检测试剂盒(一管式PCR-荧光探针法)
◆ 产品说明
致病菌检测系列可针对食品、饲料等样品中的致病微生物的特异核酸片段进行扩增,仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化,自动判读结果。本产品用于空肠弯曲菌的检测。检出限为103 CFU/ml。
◆ 产品组成(96测试)
012162LⅡ | |
试剂 | 含量 |
A-CJ-P | 20μL × 8管× 12排 |
NG-P | 100μl× 3支 |
PG-CJ-P | 100μl× 2支 |
ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600等实时荧光PCR仪。
◆ 自备耗材和仪器
①冰盒;②移液器(0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭菌吸头;③离心机;④涡旋混匀器;⑤金属浴;⑥均质机、搅拌机或研钵等研磨器具;⑦电子天平。
◆ 注意事项
1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1)第一区:样本制备区。
2)第二区:模板添加区。
3)第三区:扩增及产物分析区。
★ 分区之间最好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
◆ 样品处理
参照《GB 4789.9-2014 食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌检验》中的5.1处理样品,对样品进行前增菌,制备的菌液保存待用。
待测样品在100mL Bolton肉汤中进行培养,在微需氧条件下,36 ℃±1 ℃培养4 h,如条件允许配以100 r/min的速度进行振荡。必要时测定增菌液的pH值并调整至7.4±0.2,42 ℃±1 ℃继续培养24 h~48 h。
详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
◆ 实验操作
1. 模板制备(样本制备区)
建议使用试剂配套细菌组DNA提取系列产品,具体过程详见产品说明书。
2.添加模板(样本制备区,放置于冰盒中进行)
剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板、PG-CJ-P。盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30s,离心1min,立即进行PCR扩增反应。
3. 扩增反应(扩增及产物分析区)
使用荧光定量PCR仪,荧光基团选择FAM,淬灭基团选择TAMRA。
按下列条件设置扩增反应:
PCR循环 | 荧光收集位点 | ||
95℃ | 3分钟 | 1个循环 | — |
94℃ | 5秒 | 40个循环 | — |
60℃ | 40秒 | ※ |
基线调整取3-15个循环的荧光信号,阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点。
◆ 结果判定
检测样品无Ct值或≥40.0,曲线为直线或轻微斜线,无“S”型扩增曲线,可报告样品阴性,不含有空肠弯曲菌或含量低于检测限;
检测样品Ct≤35.0,曲线呈“S”型扩增曲线,可直接报告样品阳性,含有空肠弯曲菌;
检测样品35.0<Ct<40.0,需进行一次重复实验,若Ct值≥40.0则为阴性,否则为阳性。
- NG反应为平滑直线,PG反应为“S”型扩增曲线且Ct值<30,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持人员联系。